Núcleo de Imagem Celular e Molecular

A missão da instalação do Núcleo de Imagem Celular e Molecular (CMI) do centro COBRE de Neurociência Integrativa é fornecer infraestrutura e recursos necessários para realizar imagens celulares e moleculares de biomoléculas, bem como preparação de mídia para pesquisas adicionais na Universidade de Nevada, Reno ( UNR). A instalação do Core está localizada no terceiro andar do edifício Fleischmann Lifesciences no Departamento de Biologia da Faculdade de Ciências.

A instalação CMI Core fornece acesso a instrumentos de última geração, incluindo um novo sistema de imagem de dois fótons Scientifica HyperScope para varredura de tecidos profundos em cérebros vivos e animais inteiros, um sistema de microscópio confocal Leica SP8 equipado com um LIGHTNING que permite a captura de detalhes celulares e observe a dinâmica com uma resolução de até 120 nm, um microscópio vertical Leica Thunder 3D Tissue, um estereomicroscópio Leica Thunder Model Organism destinado a visualizar embriões, órgãos e pequenos organismos como Drosophila e C. elegans, um GE Phosphoimager para Northern blotting , um BioRad ChemiDoc para Western blotting, dois instrumentos BioRad Real-Time PCR para PCRs precisos e quantitativos, um QIAgility para configuração de PCR automatizada, um espectrofotômetro GeneSys 180 UV/Vis e um fluorômetro Quibit 4.

Outras capacidades do núcleo incluem instrumentos de preparação de meios e recursos para criação de Drosophila e C. elegans usados ​​como organismos modelo.

Localização: FA 318 (necessário acesso com chave)

A microscopia de dois fótons tornou-se uma ferramenta indispensável para a neurociência celular, permitindo imagens fluorescentes de alta resolução de células in vitro e in vivo, cérebro vivo e animais inteiros. O sistema HyperScope é um microscópio de dois fótons de construção personalizada equipado com um laser de Ti-safira amplamente sintonizável Mai-Tai eHPDS (690-1040 nm), múltiplas objetivas (16x, 20x e 40x) e fica em uma placa de ensaio Thorlabs e mesa antivibração. Com a câmera Scientifica SciCam Pro CCD, é possível realizar imagens funcionais de taxas de quadros de vídeo de 24 fps (resolução total) e 40 fps (combinados 2 x 2). O conjunto do detector inclui um módulo PMT com desvio para o vermelho e um módulo GaAsP PMT e imagens de epifluorescência com conjuntos de filtros para GFP (extinção 470/40x, emissão 525/50m) e mCherry (extinção 560/40x, emissão 630/75m). Os espelhos de varredura no caminho da imagem podem ser organizados em várias configurações, dependendo de suas necessidades. Com até 3 espelhos em série, você pode escolher entre arranjos galvo/galvo (GG), ressonante/galvo (RG) ou ressonante/galvo/galvo (RGG). O microscópio é equipado com uma unidade de eixo Z ultra suave para garantir movimento livre de vibração, com o eixo Z sendo controlado com software para aquisição de pilhas z com um tamanho de passo mínimo de 0,1 mm. A adição de um posicionador de objetiva de eixo Z Piezo permite imagens de volume de até 400 mm. O microscópio pode ser facilmente configurado e alternado entre aplicações in vitro e in vivo removendo a ótica do subestágio e o bloco riser. O sistema é fechado em uma gaiola opaca para evitar poluição luminosa e sonora de amostras biológicas.

Essa plataforma inclui um premiado software de aquisição Scientifica SciScan, permitindo que os usuários integrem o SciScan facilmente com aplicativos personalizados, como LabView e ScanImage. A interface do software ScanImage (Vidrio Technologies) usada pela Scientifica foi desenvolvida pela HHMI Janelia Farm especificamente para aplicações em neurociência e é considerada o software mais avançado para varredura a laser de dois fótons do mercado.

Os principais recursos exclusivos do Scientifica HyperScope incluem:

Local: FA 324

O confocal Leica TCS SP8 LIGHTNING permite a extração de informações de imagem com aquisição de super resolução que explora a resolução lateral de subdifração da microscopia confocal. Ele permite capturar detalhes celulares e observar a dinâmica com uma resolução de até 120 nm, que está próxima das capacidades do microscópio de super resolução STED. O confocal vertical é capaz de coleta simultânea de até 3 canais de detecção (dois PMTs, um HyD) usando várias linhas de laser (diodo 405, azul 488, verde 552, vermelho 638 nm). O confocal é configurado com um scanner tandem convencional (8 kHz), um estágio super Z-galvo tipo S, múltiplas objetivas (10x, 20x, 25x, 40x, 63x) e fica em uma mesa antivibração. O confocal é conectado a uma estação de trabalho de computador equipada com o software Leica LAS-X e um monitor de 30 polegadas.